铁稳态正在闭节软骨壮健中起着主动的效用。铁过量或铁超载可诱导软骨细胞氧化应激毁伤和铁殒命细胞殒命,促使膝骨闭节炎(KOA)。然而,迄今为止,很少有有用的药物诊治铁超载惹起的KOA (IOKOA)。中草药为诊治骨质松散等骨代谢疾病的药物选拔供给了雄厚的资源。生物茶素A (Biochanin A, BCA)是一种从黄芪平分离取得的新型生物活性众性能自然化合物,具有爱惜骨质流失的效用。然而,BCA正在诊治IOKOA中的效用和机制尚不了了。
腹腔打针铁糊精(500 mg/kg),创造铁超载小鼠模子。通过手术诱导OA,并正在手术后8周评估发展。体内采用显微ct和Safranin-O/Fast绿色染色评估OA告急水平。用珀尔氏普鲁士蓝染色评估膝闭节和滑膜的铁浸积。然后将柠檬酸铁铵(FAC)赐与原代软骨细胞,以评估铁调动剂介导的铁稳态。甲苯胺蓝染色法审定体外软骨细胞。采用CCK-8法测定细胞生气。采用Annexin V-FITC/PI法测定细胞凋亡率。细胞内铁程度检测行使钙黄卵白am试验。荧光密度反应活性氧(ROS)、脂质-ROS和线粒体膜电位。行使RT-qPCR和western blotting检测外达程度。
铁超载小鼠膝闭节显微ct和机闭学染色显示软骨降解和铁蕴蓄堆积彰着加添。BCA能够省略铁浸积,减轻KOA的告急水平。甲苯胺蓝染色和CCK-8检测注解BCA对铁杀伤的软骨细胞有必然的修复效用。铁超载导致细胞凋亡率升高,BCA可改正细胞凋亡率。别的,柠檬酸铁铵(FAC)解决加添了细胞内铁、ROS和脂质ROS含量,但分别浓度BCA解决后收复了细胞内铁、ROS和脂质ROS含量。JC-1染色显示BCA可减轻铁超载惹起的线粒体毁伤。
铁超载正在体内和体外均可促使软骨细胞铁殒命。别的,铁超载通过催化ROS天生导致线粒体性能窒碍,制止胶原II的外达,诱导MMP的外达。咱们的咨议结果注解,BCA能够通过制止TfR1和促使FPN直接下降细胞内铁浓度,也能够通过Nrf2/system xc-/GPX4信号通道扫除自正在基,防守脂质过氧化。本咨议结果提示BCA调动骨闭节炎发展流程中的铁稳态,为骨闭节炎的诊治开荒了新的界限。
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